Diferença entre contagem total de células e contagem de células viáveis

o diferença chave entre a contagem total de células e a contagem viável de células é que a contagem total de células estima todas as células, incluindo células microbianas vivas e mortas em uma amostra, enquanto a contagem viável de células estima apenas as células microbianas vivas em uma amostra.

Contar o número de organismos dentro de uma população é considerado necessário para a maioria dos trabalhos experimentais. Portanto, tentamos analisar o número de micróbios em uma amostra usando métodos diretos e indiretos. As medições diretas envolvem métodos que contam números de células diretamente. As medições indiretas envolvem a medição de algum parâmetro que pode estar relacionado ao número de células, como densidade celular, peso seco, etc. Alguns métodos quantificam apenas as células microbianas vivas em uma amostra. A contagem de células viável é um desses métodos. Contagens microscópicas diretas quantificam todas as células em um volume conhecido de meio / amostra usando um microscópio. Portanto, conta células vivas e mortas. É um tipo de contagem total de células.

CONTEÚDO

1. Visão geral e principais diferenças
2. O que é contagem total de células 
3. O que é contagem viável de células
4. Semelhanças entre a contagem total de células e a contagem viável de células
5. Comparação lado a lado - contagem total de células vs contagem de células viáveis ​​na forma de tabela
6. Resumo

O que é contagem total de células?

A contagem total de células é o método que envolve a contagem de todas as células em um volume conhecido de meio / amostra usando um microscópio e uma câmara de contagem (hemocitômetro). Diferentemente das contagens viáveis, as células vivas e mortas são contadas. Portanto, essa é uma contagem total, a menos que uma mancha de viabilidade seja aplicada durante a observação. Na microscopia, as células são observadas diretamente ao microscópio e contadas. Ele usa uma suspensão de células que consiste em células microbianas. Para facilitar a contagem e medições precisas, é possível realizar a diluição da amostra. Em concentrações muito altas / baixas de células, obter a contagem total de células usando um microscópio é uma tarefa difícil.

Figura 01: Câmara de contagem - hemocitômetro

As câmaras de contagem são fáceis, baratas e rápidas em obter uma contagem total de células. Mais importante ainda, as câmaras de contagem são úteis para a contagem de eucariotos e procariotos. Contamos células em quadrados selecionados de volume conhecido para quantificar a contagem total de células.

O que é contagem viável de células?

A contagem de células viável é um método de contagem de células microbianas vivas em uma amostra. Ele conta apenas células vivas na amostra. Contagem de placas viável, filtração por membrana e número mais provável são poucas técnicas viáveis ​​de contagem de células. Essas abordagens são baseadas no crescimento. O método viável de contagem de placas é um método poderoso usado em muitos campos microbiológicos, incluindo microbiologia de alimentos e laticínios, microbiologia médica, microbiologia ambiental, genética microbiana, desenvolvimento de meios de crescimento e biotecnologia.

A maneira mais comum de contar bactérias viáveis ​​é usar uma amostra capaz de formar colônias em meio de ágar. Existem duas maneiras principais de realizar uma contagem de placas: técnica de espalhar e espalhar. Um volume conhecido de amostra pode ser espalhado na superfície de uma placa de ágar ou misturado no ágar. A placa é então incubada e as colônias resultantes são contadas. O número de colônias está relacionado ao número de microrganismos na amostra original. Contagens viáveis ​​medem apenas as células que estão vivas e em crescimento.

Figura 02: Contagem de placas viáveis

O número mais provável (MPN) é uma alternativa aos métodos de contagem de placas para estimar a densidade populacional de células viáveis. Conta organismos que crescem em cultura líquida e, portanto, é uma técnica predominantemente bacteriológica. É particularmente útil para baixas concentrações de organismos, p. leite, água potável.

A técnica de filtragem por membrana é mais adequada quando os micróbios são muito diluídos, como no abastecimento de água da cidade. Isso é feito simplesmente passando um volume conhecido do líquido através de um filtro e incubando-o em um meio nutriente. As colônias que se desenvolvem no filtro são contadas e as bactérias por mililitro da amostra são calculadas.

Quais são as semelhanças entre a contagem total de células e a contagem viável de células?

• Contagem total de células e contagem viável de células são dois tipos de técnicas microbianas que quantificam células.
• São técnicas de enumeração comumente usadas em laboratórios de microbiologia.

Qual é a diferença entre a contagem total de células e a contagem viável de células?

A contagem total de células enumera todas as células microbianas vivas e mortas em uma amostra. Por outro lado, a contagem viável de células enumera apenas as células vivas em uma amostra. Portanto, essa é a principal diferença entre a contagem total de células e a contagem viável de células. A contagem total de células é independente do crescimento de colônias em placas de ágar, enquanto a contagem viável de células é uma técnica baseada no crescimento e depende do crescimento de colônias microbianas em placas de ágar.

O gráfico abaixo resume a diferença entre a contagem total de células e a contagem viável de células.

Resumo - Contagem total de células x contagem de células viáveis

A contagem total de células enumera células microbianas vivas e mortas, enquanto a contagem viável de células enumera apenas as células vivas. Portanto, essa é a principal diferença entre a contagem total de células e a contagem viável de células. Além disso, a contagem viável de células é uma técnica baseada no crescimento, diferentemente da contagem total de células. Além disso, requer incubação de placas até obter as colônias visíveis. Contagem viável de placas, MPN e filtração por membrana são poucas técnicas de contagem viável de células, enquanto a microscopia direta e o uso de hemocitômetro são duas técnicas de contagem total de células.

Referência:

1. "Contando bactérias". Lúmen, disponível aqui.

Cortesia da imagem:

1. “Hemocitômetro” de Todd - originalmente publicado no Flickr como 0356 (CC BY-SA 2.0) via Commons Wikimedia
2. “Verdünnungsreihe mit Ausplattieren” Por Leberechtc - Trabalho próprio (CC BY 3.0) via Commons Wikimedia